人類嗜T淋巴細胞病毒(HTLV)酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說明書

 

本試劑盒僅供研究使用。

 

96T

 

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中類嗜 T 淋巴細胞病毒(HTLV)表達。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人類嗜 T 淋巴細胞病毒(HTLV)表達。用純化的人類 嗜 T 淋巴細胞病毒(HTLV)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中類嗜 T 淋巴細胞病 毒(HTLV)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的類嗜 T 淋巴細胞 病毒(HTLV)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。 TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm  波長下測定吸光度（OD 值），與 CUTOFF 值相比較，從而判定標本中人類嗜 T 淋巴細胞病 毒(HTLV)的存在與否。

試劑盒組成

 

1	30 倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶	7	終止液	6ml×1 瓶
2	酶標試劑	6ml×1 瓶	8	陽性對照	0.5ml×1 瓶
3	酶標包被板	12 孔×8 條	9	陰性對照	0.5ml×1 瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1 瓶	10	說明書	1 份
5	顯色劑 A 液	6ml×1 瓶	11	封板膜	2 張
6	顯色劑 B 液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1 個

標本要求

1 ．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.     編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設(shè)陰性對照2 孔、陽性對照2 孔、空白對照 1 孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.     加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl 。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl ，然后再加待測樣品 10μl 。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不 觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.     溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.     配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.     洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。

6.     加酶：每孔加入酶標試劑 50μl ，空白孔除外。

7.     溫育：操作同 3。

8.     洗滌：操作同 5。